qPCR 和 PCR 微孔板和密封膜指南V1..0
qPCR 和 PCR 微孔板和密封膜指南
关键要点：
qPCR 或定量聚合酶链式反应和 PCR 测试广泛用于遗传和核酸（DNA 或 RNA）分析。尽管 qPCR 和 PCR 存在差异，但它们都需要相同的基本耗材：微孔板，用于容纳实验所需的少量样品和试剂。密封膜是这些实验中经常使用的另一种实验室耗材，用于在测试过程中 覆盖和保护微孔板。
了解如何正确选择微孔板和密封膜是实现成功且可重复的 qPCR 和 PCR 测试以及避免污染的重要一步。
在本手册中，我们将探索有关 qPCR 和 PCR 测试的微孔板和密封膜的知识。我们将分析qPCR 和 PCR 之间的差异、可用的不同类型的微孔板以及如何为 qPCR 和 PCR 实验选择密封膜。
您需要了解的 PCR 和 qPCR 知识
什么是 PCR？
聚合酶链式反应 (PCR) 是一种实验室技术，可扩增特定 DNA 序列，从而检测和分析少量 DNA。该过程涉及在酶存在下反复加热和冷却样本以复制特定 DNA 序列。
什么是 qPCR？
定量聚合酶链式反应 (qPCR) 是 PCR 的改进版本，可以测量样本中存在的 DNA 量。qPCR 通常用于生物医学研究和临床诊断，以检测传染病、基因突变和基因表达分析。
qPCR 和 PCR 在研究中有哪些常见应用？
PCR 和 qPCR 是许多研究领域广泛使用的技术，包括遗传学、微生物学和生物医学。
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在遗传学中，PCR 通常用于扩增和分析特定的 DNA 序列，包括与遗传疾病或基因表达有关的序列。
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在微生物学中，PCR 用于检测和鉴定细菌和病毒，例如传染病诊断。
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在生物医学中，qPCR 常用于测量基因表达水平，可以深入了解疾病过程和药物疗效。
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此外，PCR 还用于法医、环境科学和农业领域。
微孔板和封口膜在 qPCR 和 PCR 实验中的作用
微孔板和密封膜在 qPCR 和 PCR 实验中发挥着关键作用，为核酸的扩增和检测提供了平台。
微孔板通常用于反应混合物，其中包含 DNA 模板、引物和核苷酸，而密封膜则用于覆盖微孔板并防止污染。然后将密封的微孔板放入热循环仪中，热循环仪加热和冷却反应混合物以扩增 DNA。
微孔板通常由高品质聚丙烯 (PP) 制成，具有多种孔型，包括96 孔板和384 孔板。这些板可同时处理多个样品，并可与自动化系统一起使用，从而实现高通量实验。
密封膜用于防止 qPCR 和 PCR 实验期间的污染和蒸发。这些膜通常由塑料聚合物制成，有各种尺寸以适应不同的微孔板规格。密封膜可以使用或不使用粘合剂，有些膜设计为可刺穿的，无需取下膜即可轻松进入孔中。
选择合适的微孔板和密封膜对于 qPCR 和 PCR 实验的成功至关重要。需要考虑的因素包括孔规格、密封性能以及与热循环仪的兼容性。
研究人员还必须确保微孔板和封膜不会干扰qPCR实验中使用的荧光检测，因为某些物质会干扰荧光信号的检测。
使用正确的微孔板和密封膜进行 qPCR 和 PCR 的重要性
PCR 和 qPCR 是强大的技术，可帮助研究人员以高精度和高灵敏度扩增和检测核酸序列。然而，为了获得准确且可重复的结果，在这些测定中使用正确的微孔板和密封膜至关重要。以下是一些原因：
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兼容性：不同的微孔板和密封膜设计用于特定的热循环仪、PCR 机和 qPCR 仪器。使用错误的微孔板或密封膜会导致密封不良、加热不均匀和扩增不一致。这会导致假阳性或阴性结果，浪费时间、金钱和资源。
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可重复性：PCR 和 qPCR 需要精确控制温度、压力和湿度。这些参数的任何变化都会影响扩增产物的质量和数量。使用合适的微孔板和密封膜有助于确保实验条件一致，从而提高可重复性和可靠性。
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效率：PCR 和 qPCR 可能耗时且成本高昂，尤其是在处理大样本量或复杂分析时。使用合适的微孔板和密封膜（以及使用自动密封设备）可以帮助优化反应条件，最大限度地减少试剂损失，并提高通量，使流程更高效、更具成本效益。
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灵活性：不同的微孔板和密封膜提供各种定制选项，例如孔尺寸、颜色、材料和表面处理。选择合适的微孔板和密封膜可以帮助根据实验的特定需求定制检测，例如多路复用、高通量筛选或单细胞分析。
您是否对密封膜有特殊要求，需要特殊解决方案？我们提供定制/OEM密封解决方案。
选择 qPCR 和 PCR 微孔板时需要考虑的因素
选择用于 qPCR 和 PCR 实验的微孔板时，需要考虑几个因素，包括：
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孔格式：微孔板最常见的孔格式是 96 孔板和 384 孔板。孔格式的选择取决于要处理的样品数量和每个孔所需的反应混合物量。
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材质：微孔板通常由塑料制成，例如聚苯乙烯或聚丙烯。材质的选择会影响微孔板与某些溶剂和试剂的兼容性，以及其耐高温能力。
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光学清晰度：微孔板的光学清晰度会影响 qPCR 实验期间荧光信号的检测。透明塑料或玻璃板通常用于基于荧光的检测，而不透明板可用于其他类型的检测。
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热导率：微孔板的热导率会影响PCR实验过程中的升温和降温速度，热导率较高的微孔板可以减少温度变化所需的时间，提高反应效率。
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与热循环仪的兼容性：确保微孔板与所使用的热循环仪兼容非常重要。有些热循环仪需要特定类型的微孔板，或者可能对最大孔深或容量有限制。
研究人员必须仔细考虑这些因素，以确保他们的 qPCR 和 PCR 实验获得最佳结果。
qPCR 和 PCR 微孔板类型
有几种类型的微孔板可用于 qPCR 和 PCR 实验，每种都有各自的优点和缺点。一些常见的微孔板类型包括：
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标准 96 孔板：这是 qPCR 和 PCR 实验中最常用的微孔板。它们的孔容量约为 200 µL，可与大多数热循环仪兼容。
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低轮廓 96 孔板：这些板比标准 96 孔板轮廓低，可减少所需的反应混合物体积并改善热传递。然而，它们可能更容易蒸发，需要专门的密封膜。
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384 孔板：这些板的孔比标准 96 孔板小，可实现更高的通量并减少试剂消耗。然而，由于它们尺寸较小且孔数较多，因此操作起来可能更具挑战性；它们也可能需要专门的移液器。
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裙边板和非裙边板： 裙边板的边缘有塑料裙边，可以提供额外的稳定性并防止板变形。非裙边板没有此功能，但往往与更广泛的设备具有更好的兼容性。
微孔板类型的选择取决于具体的实验要求，包括样品数量、反应量和通量。研究人员必须仔细考虑这些因素，为他们的 qPCR 和 PCR 实验选择最合适的微孔板。
EBAIAO 针对 qPCR 和 PCR 的微孔板建议
在EBAIAO，我们专注于提供高品质的实验室耗材和设备。我们提供一系列适用于qPCR 和 PCR 应用的高品质微孔板。以下是我们的一些微孔板推荐：
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qPCR 板：此板专为 qPCR 检测而设计，具有薄壁结构，可促进快速高效的热传递。它体积小巧，与大多数 qPCR 仪器兼容。
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无裙边 PCR 板：此板是标准的 96 孔板，可与大多数热循环仪兼容。它的每个孔周围都有凸起的边缘，以防止污染，并配有低蒸发盖，以减少样品损失。
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384 孔 PCR 板：此板的孔比标准 96 孔板小，可实现更高的通量并减少试剂消耗。每个孔周围都有凸起的边缘以防止污染，并配有低蒸发盖以减少样品损失。
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双材质PCR 板：此板采用坚固的双组分硬壳设计，可消除 PCR 测试过程中的翘曲和变形。它是一种带裙边的板，可以提供额外的稳定性并防止孔之间的污染。
选择 qPCR 和 PCR 封膜时需要考虑的因素
选择合适的密封膜是进行 qPCR 和 PCR 实验时的一个重要考虑因素。以下是一些需要考虑的因素：
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兼容性：封膜应与所用的微孔板类型兼容，并应能够承受 PCR 反应过程中产生的温度和压力。您还应选择不会干扰 PCR 反应并导致抑制或非特异性结合的薄膜。
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光学清晰度：如果实验涉及荧光检测，则密封膜应光学清晰且不会干扰信号。
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附着力：封膜应与微孔板有良好的附着力，以防止蒸发和污染。
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抗穿刺性：密封膜应具有抗穿刺性，以防止样品泄漏和孔之间的交叉污染（除非您特别要求可刺穿的密封膜）。
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耐化学性：封膜应能抵抗PCR实验中常用的化学物质，例如乙醇和DMSO。
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剥离性：如果需要，密封膜应该易于剥离，不会留下任何残留物或损坏微板。
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成本：应考虑封膜的成本，特别是对于高通量实验。
用于qPCR和PCR实验的最常见密封膜类型包括自粘膜和热封膜。
粘合膜是最常用的，有多种材质可供选择，例如聚丙烯、聚酯和铝。热封膜用于高通量实验，需要专门的热封设备进行密封。
选择合适的封膜对于qPCR和PCR实验的成功至关重要。
研究人员必须仔细考虑上述因素，根据其特定的实验要求选择最合适的密封膜。
qPCR 和 PCR 密封膜类型
有几种类型的板密封膜可用于 qPCR 和 PCR 实验，每种都有各自的优点和缺点。一些常见的板密封膜类型包括：
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用于 qPCR 和 PCR 的自粘密封膜：自粘密封膜是 qPCR 和 PCR 检测的热门选择，因为它们易于使用且密封可靠。这些薄膜由薄而透明的材料制成，背面带有粘合剂，可粘附在微板上，形成紧密的密封，防止污染和蒸发。
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光学透明自粘密封膜：光学透明自粘密封膜是一种专为基于荧光的 qPCR 和 PCR 检测而设计的密封膜。这些膜由透明的薄材料制成，可实现最佳的光线传输，从而确保准确可靠的荧光测量。
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热封密封膜：热封密封膜通过加热在微板上形成更持久的密封。这些薄膜由薄而柔韧的材料制成，可以使用热封设备轻松密封。热封密封膜提供紧密、安全的密封，可防止污染和蒸发，适用于低温和高温反应。
PCR专用封膜形式
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独立通道热封膜：独立通道密封膜是层压密封，具有 96 个独立箔密封点或 12 条，每条覆盖可拆卸背衬上的 8 个孔。它们是使用条管的 PCR 应用的理想选择，可作为手动和半自动密封设备的片材使用。
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可剥离条带热封膜：可剥离条带热封膜结合了自粘膜的便利性和热封膜的可靠性。这些膜由薄而透明的材料制成，带有可粘附在微板上的粘合剂背衬和可剥离的条带，可轻松去除。
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可刺穿热封膜：这些薄膜具有一层薄层，可以用移液器尖端或其他尖锐物体轻松刺穿以取出样品，而不会破坏密封。这使得它们成为需要频繁取样的实验的良好选择。
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DMSO/耐溶剂热封膜： DMSO/耐溶剂热封膜由耐用材料制成，可以抵抗溶剂和极端温度。
EBAIAO针对 qPCR 和 PCR 的封膜建议
在EBAIAO，我们专注于提供高品质的实验室耗材和设备，包括一系列适用于 qPCR 和 PCR实验的封口膜。以下是我们为您的 qPCR 和 PCR 实验选择最合适的封口膜的建议：
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透明自粘密封膜：此密封膜是一种高品质的粘合膜，带有 96 个光学透明窗口，可提供强大的密封完整性，同时提高光学性能。此可剥离密封膜由耐用的透明聚酯薄膜制成，适用于 qPCR 和光学应用，包括荧光或比色测量。
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透明热封膜：经济高效且可靠的热封膜的完美解决方案，适用于 qPCR 和光学应用。
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铝箔自粘密封膜： 是一种有效、强力粘合的铝箔密封膜，适用于高温应用。它可防止样品蒸发，并具有穿孔端片，便于剥离。可刺穿的铝箔以不规则的方式撕裂，从而防止形成真空。
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强力热封膜： ThermASeal 热封膜是一种重型可剥离箔密封膜，可提供 100% 有效的板密封方法，确保密封完整性。它提供坚固、耐溶剂的密封，与聚丙烯板兼容，是低温化合物储存和长期室温储存的理想选择。由于其耐用性，该密封膜还适用于样品运输。刺穿密封膜的唯一方法是使用刀片，确保最大程度地保护样品。
EBAIAO提供多种适用于 qPCR 和 PCR 实验的密封膜选择。每个密封都具有完整的密封完整性，可防止样品蒸发和污染。
为 qPCR 和 PCR 选择正确的微孔板和密封膜组合的指南
微孔板与封口膜的兼容性对于qPCR和PCR检测也至关重要。封口膜提供了一道屏障，防止反应过程中的污染和蒸发，这对于获得准确可靠的结果至关重要。
如果密封膜与微板不兼容或粘附不正确，则会导致问题。
在为 qPCR 和 PCR 选择正确的微孔板和密封膜组合时，需要考虑以下一些关键因素：
1. 考虑您想要的应用程序
根据实验要求来确定哪种类型和格式的微孔板最适合您的样品：
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所需样品的数量、样品量以及进行的反应类型将帮助您选择适合您需求的微孔板格式。
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反应条件也很重要；如果您计划进行高温反应，例如热启动 PCR，请确保微孔板和密封膜温度稳定，能够承受高温而不会熔化、翘曲或降解。
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进行 qPCR 时，请考虑微孔板和密封膜的光学特性，因为某些材料可能会干扰定量，导致结果不准确。不建议使用铝箔，因为它缺乏光学透明度，但在用透明膜替换之前，它可能适合某些步骤。
2. 考虑微孔板与封口膜的兼容性
确保密封膜与您使用的微孔板兼容。这可以通过查看制造商的建议或在进行实验之前进行兼容性测试来确定。如果您需要专家帮助，请联系我们。
3. 考虑您的工作流程和设备
确保您选择的微孔板与您现有的设备兼容。如果您想要改进工作流程以实现更好的密封和更高的样品吞吐量，您还可以考虑使用自动热封机。
4. 选择优质耗材以获得最佳效果
虽然可能有更便宜的微孔板和密封膜可供选择，但它们可能无法提供与更高质量的选项相同水平的可靠性和准确性，从而导致结果不佳。
通过考虑这些因素，您可以根据 qPCR 和 PCR 测试需求选择正确的微孔板和密封膜组合，确保结果准确可靠。
在 qPCR 和 PCR 中使用微孔板和密封膜的最佳实践
进行 qPCR 和 PCR 实验时，选择合适的材料并遵循最佳实践以确保最佳性能非常重要。这些最佳实践包括：
1. 使用与您的仪器和分析兼容的高质量微孔板。
2. 选择适合您的 qPCR 或 PCR 应用的密封膜，例如可剥离、可刺穿或粘合膜。
3. 使用适当的密封技术：
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避免将水井注得过满，以防止泄漏和污染。
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均匀地涂抹密封膜，并施加恒定的压力以确保密封严密。如果您遇到这个问题，请考虑使用热封设备。
3. 防止污染：
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每次实验都使用新的微孔板或经过充分清洁和脱氢的微孔板。
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请勿重复使用密封膜
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确保戴上手套
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确保清洁表面并尽可能在紫外线罩内工作
3. 优化样本量
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不要让微孔板装得太满
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为您的实验选择正确的尺寸和体积，并
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请记住——液体在加热时会产生压力并且膨胀！
4. 储存和处理注意事项
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将微孔板和密封膜存放在阴凉干燥的地方，以防止损坏和变质。
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使用适当的密封膜和微孔板进行长期储存，特别是在低温下（推荐使用箔密封、热密封等产品）
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去除密封膜时，请采取轻柔且可控的动作，以免扰乱样品或产生气溶胶。
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根据当地法规适当处理使用过的微孔板和密封膜。
通过遵循这些最佳实践，研究人员可以提高数据质量并在 qPCR 和 PCR 实验中获得更可靠、更一致的结果。
使用 EBAIAO 微孔板及封口膜，最大程度提升 qPCR 及 PCR 的准确性及效率
选择适合 qPCR 和 PCR 实验的微孔板和密封膜对于获得准确可靠的结果至关重要。在EBAIAO，我们提供一系列专为 qPCR 和 PCR 应用设计的微孔板和密封膜。
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